C端测序技术，即蛋白质C端（羧基端）序列测定方法，是蛋白质组学研究中的关键技术之一。相较于N端测序，C端序列分析在发展历程中曾面临诸多挑战，因而其发展路径既展现了科学技术的进步，也反映了蛋白质化学研究方法的演变。从传统化学降解法到现代高分辨率质谱技术，该技术经历了一系列重要变革。

一、早期化学方法的探索

C端测序最早期的方法主要基于化学降解技术，通过特定试剂选择性地裂解蛋白质或多肽分子，逐步释放末端氨基酸，以推测其序列。相比于经典的Edman降解技术在N端测序中的成功应用，C端的化学降解由于蛋白质C端的化学性质较为复杂，使得反应选择性较低，影响测序的精确性和可靠性。早期研究人员尝试了羧肽酶降解法，即利用特异性羧肽酶逐步水解蛋白质的C端残基，从而推测其序列。然而，由于酶的特异性限制和反应效率不高，该方法的应用受到一定局限。

二、酶解法的改进与应用

随着蛋白质酶解技术的发展，研究人员逐步优化了酶解条件，开发了更高效的羧肽酶组合策略，提高了C端序列测定的准确性。不同类型的羧肽酶能够识别特定氨基酸残基，利用多种酶协同作用，可以提高C端测序的解析度。然而，该方法仍然存在酶切效率受底物序列影响较大的问题，难以在复杂蛋白质混合物中实现高通量应用。

三、质谱技术的崛起

20世纪末至21世纪初，质谱技术的突破性发展彻底改变了蛋白质组学的研究模式，也推动了C端测序技术进入新的阶段。基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱（MALDI-TOF MS）和电喷雾电离串联质谱（ESI-MS/MS）等高分辨率分析手段，使得蛋白质的C端序列解析变得更加高效和精确。

基于质谱的C端测序技术通常结合化学衍生方法或酶解策略，增强C端肽段的检测信号。通过特定的C端标记方法，如酯化、羟胺修饰等，可选择性富集C端肽段，改善测序效果。此外，串联质谱（MS/MS）能够提供丰富的碎片信息，使得C端序列解析更加精准。这些技术的结合，使得C端序列测定在蛋白质翻译后修饰、降解途径研究以及新蛋白的功能解析等方面展现出广泛的应用价值。

四、现代高通量技术的发展

在蛋白质组学进入高通量研究时代后，C端测序技术进一步朝着自动化、灵敏化和高覆盖率方向发展。最新的质谱技术，如高分辨率Orbitrap质谱和离子淌度质谱（TIMS-MS），结合生物信息学算法，能够在大规模蛋白质鉴定中提供C端序列信息。此外，化学标记和亲和富集技术的进步，也进一步提高了C端肽段的检测能力，使得该技术在蛋白质修饰、降解机制研究等领域发挥作用。

C端测序技术的发展历程见证了蛋白质组学技术的演变，从早期的化学降解法、酶解法，到现代的高分辨率质谱分析，每一代技术的进步都在推动蛋白质研究向更深层次迈进。尽管其仍面临例如序列覆盖率、特异性富集等问题，但随着新型质谱仪器和数据分析方法的不断发展，该技术在未来的蛋白质组学研究中将发挥更为重要的作用。

百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

2.获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务；

3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；

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5.服务3000+企业，10000+客户的选择；

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