iTRAQ和TMT（同位素标记与串联质谱定量分析）的核心在于通过同位素标记对蛋白质进行标记，使得在质谱分析中可以同时对多个样本进行比较。iTRAQ（Isobaric Tags for Relative and Absolute Quantitation）和TMT（Tandem Mass Tag）是常用的同位素标记与串联质谱定量分析技术。这两种技术帮助研究人员实现复杂生物样本中蛋白质的相对和绝对定量。

iTRAQ技术是通过使用标记试剂对蛋白质的胺基进行标记，形成同位素标记的肽段。之后，这些标记化的样本被结合在一起进行串联质谱分析，以获得其相对或绝对定量信息。TMT则类似于iTRAQ，但其标记试剂和化学结构有所不同，通常可以实现更高的多重性和精确度。iTRAQ和TMT的结合使用能够在一次实验中分析多个样本，极大地提高了实验效率和数据的对比性。

iTRAQ和TMT的应用主要体现在其高通量和高精度的蛋白质定量能力，这使得其在医学研究、药物开发、以及农业生物技术等多个领域得到了广泛应用。例如，研究人员可以利用iTRAQ和TMT来分析疾病组织中的蛋白质表达差异，从而帮助识别潜在的疾病生物标志物。同时，这两种技术也被用于研究药物的作用及毒性，以指导新药研发。此外，在农业生物技术中，iTRAQ和TMT也被用来研究植物在不同环境条件下的蛋白质变化，为作物改良提供数据支持。

一、iTRAQ技术

1、原理

iTRAQ（同位素标记相对和绝对定量）技术采用 4 种或 8 种同位素编码的标签，通过特异性标记多肽的氨基基团来实现定量分析。iTRAQ 试剂包括报告基团、平衡基团和肽反应基团。报告基团质量不同，如为 113Da、114Da 等；平衡基团使不同试剂分子量相同；肽反应基团将试剂与肽段连接。标记后的肽段在一级质谱中因质量相同表现为一个峰，二级质谱中平衡基团丢失，报告基团产生不同质量数的报告离子，其强度代表标记肽段的相对丰度。

2、iTRAQ技术特点

可精确比较多达 8 个样本的蛋白含量，标记效率高达 97%；能通过 SCX - HPLC 实现自动化高效分离；基于高分辨率、高质量精度质谱平台，可鉴定多达 6000 种蛋白，能检测低丰度等特殊蛋白；无物种特异性限制。

3、实验流程

首先对不同蛋白质样品进行蛋白酶水解，通常用胰蛋白酶；然后采用不同的 iTRAQ 标记试剂对酶解片段进行标记后混合；接着使用液相色谱和质谱联用进行一级质谱和二级质谱分析；最后对质谱数据进行生物信息分析，实现定性和定量研究。

二、TMT技术

1、原理

TMT（串联质谱标记）技术原理与 iTRAQ 类似，采用 2 种、6 种、10 种或 16 种同位素标签，特异性标记多肽的氨基基团。TMT 标签由分子量报告子、分子量标准化部分和反应基团组成。在一级质谱中，不同样本中同一肽段标记后质荷比相同，二级质谱中释放出的分子量报告子产生不同报告离子峰，其强度反映肽段在不同样品中的相对表达量，肽段碎片离子峰质荷比反映肽段序列信息，从而实现蛋白质定性和相对定量。

2、TMT技术特点

通量更高，一次可同时标记 16 种不同生物样品；报告基团间最小分子质量差为 6/1000Da，分辨率更高，可降低实验误差。

3、实验流程

先进行蛋白提取和质控，确保蛋白样品的质量和纯度；再用 TMT 试剂标记肽段；然后通过 HPLC 分级对标记后的肽段进行分离；接着进行质谱分析；最后对质谱数据进行数据库处理和生物信息学分析，得到蛋白质的定性和定量结果。

同位素标记与串联质谱定量分析可以同时对多个样本进行标记和分析，大幅提高了研究效率。通过精确的同位素标记和质谱技术，iTRAQ和TMT能够提供高精度的蛋白质定量结果。百泰派克生物科技提供高质量的iTRAQ和TMT同位素标记与串联质谱定量分析服务。我们的服务致力于为客户提供精确的蛋白质定量数据，高效解析复杂的生物样本。我们期待与您合作，共同推动科学的进步。

百泰派克生物科技特色项目

一、蛋白测序

百泰派克生物科技使用Thermo公司新推出的Obitrap Fusion Lumos质谱仪及岛津公司埃德曼降解测序系统对蛋白质序列进行分析，提供基于质谱的蛋白测序分析服务，包括对蛋白质的氨基酸组成分析，N端测序，C端测序和全序列分析，以及基于埃德曼降解的蛋白质N端序列分析服务。对于未知理论序列的蛋白质，提供基于从头测序法的蛋白质从头测序服务，对蛋白序列进行分析。

※服务优势：

1.采用目前世界上先进的质谱仪器 Obitrap Fusion Lumos;

2.可实现对所测定靶蛋白序列 100% 的覆盖;

3.可测定蛋白N端多达 70个氨基酸序列;

4.可测定多种形式的样品: 蛋白溶液、PVDF 蛋白条带;

5.样品用量低: 蛋白样品仅需 5-10ug，即可完成检测;

6.测序不受N端封闭，PEC和和糖基化等N端修饰的影响。

二、蛋白质组学

百泰派克生物科技采用Thermo Fisher的Orbitrap Fusion Lumos质谱平台结合Nano-LC，提供定量蛋白质组学、靶向蛋白质组学、多肽组学、翻译后修饰蛋白组学等多种蛋白质组学分析服务。此外，百泰派克生物科技新推出基于timsTOF Pro的4D蛋白质组学服务，助力微量样本蛋白组学、大样本群医学及高通量修饰组学等研究工作。

※服务优势：

1 .高通量定量蛋白分析:多对照组大规模实验分析，发现新的生物标记物;

2.体内体外多种蛋白质标记方法，适用于分析组织、细胞、血液等多种样品;

3.质谱分析灵敏度高，实验结果重复度高;

4.可检测较低丰度蛋白，线性范围广;

5.专业生物信息学分析，分析更系统准确。

三、单细胞质谱流式技术分析

百泰派克生物科技采用Fluidigm质谱流式系统进行单细胞质谱流式技术分析，采用金属元素标记物（通常是金属元素标记的特异抗体）标记细胞表面和内部的分子，然后用流式细胞原理分离单个细胞，再用电感耦合等离子体质谱（ICP-MS）分析单个细胞的原子质量谱，最后将原子质量谱数据转换为细胞表面和内部的信号分子表达量。

※服务优势：

1.技术先进，填补技术空白

采用金属标记抗体技术，避免了传统流式荧光通道少且易相互影响的问题。可在单细胞层面上对多种指标同时进行表征，百泰派克生物科技可做到同时检测51个目标蛋白。

2.分析数量大，成本较低

单细胞RNAseq受成本等因素限制，所有样本细胞汇总的分析数目一般在2x10^4个左右，而流式质谱技术一次（单样本）就可分析至少10^5的细胞，实现了数量级的提高，且成本不高于单细胞RNAseq。

3.应用前景大

①流式质谱结果可以给出细胞亚群的变化，在临床诊断、疾病机制研究等方面具有极大的研究前景；

②将金属标签技术与其他技术结合会有新应用方向。除常规蛋白外，质谱流式细胞技术还可用于蛋白翻译后修饰；

③可检测细胞存活率、细胞大小、mRNA转录子表达量、DNA合成速率以及蛋白酶活性等。

四、基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现

百泰派克生物科技的基于高精度质谱的免疫多肽组学分析及新抗原发现一站式解决方案包括我们专有的、高度敏感的免疫肽富集和鉴定方案。我们能够帮助您实现10,000个以上I型多肽和10,000个以上II型多肽的鉴定和识别。通过我们优化的高通量免疫多肽组学分析平台进行免疫肽组学分析，可从最小的样品材料中进行可重复的识别和定量。该服务可以应用于大规模的研究，旨在助力科研工作者寻找癌症、免疫疾病及传染病的解决方案，深入挖掘未知的靶标。

五、生物药物表征

百泰派克基于高分辨率质谱技术，MALDI TOF，高效色谱分离技术，提供一系列完善的生物药物分析方案，从蛋白质、多肽、抗体、疫苗等生物制品的氨基酸组成和一级结构分析，到产品变异性和纯度分析。旨在提供优质生物药物分析服务，帮助生物医药生产商提高生物药物品质。

百泰派克生物科技七大检测平台

百泰派克生物科技-生物制品表征，生物质谱多组学优质服务商

北京百泰派克生物科技有限公司致力于为生物/制药和医疗器械行业提供质量控制检测和项目验证等专业服务。公司实验室遵循NMPA、ICH、FDA和EMA等的法规和指导原则，通过CNAS/ISO9001双重质量体系认证，建立了完备的质量体系，数据冷热/异地备份，设备定期计量/期间核查，软件审计追踪，为客户提供一体化解决方案和技术服务，支持新药研发、药物申报注册和生产放行。

1.公司采用ISO9001质量控制体系，专业提供以质谱为基础的CRO检测分析服务；

2.获国家CNAS实验室认可，为客户提供符合全球药政法规的药物质量研究服务；

3.业务范围覆盖蛋白质组学、多肽组学、代谢组学、生物药物表征、单细胞分析、单细胞质谱流式、生信云分析以及多组学生物质谱整合分析等；

4.七大质量控制检测平台，满足您一站式服务需求；

5.服务3000+企业，10000+客户的选择；

6.致力于为您提供优质的生物质谱分析服务!

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